Jules César (vers 1599) raconte le complot fomenté par un groupe de sénateurs romains, mené par le noble et idéaliste Brutus convaincu d'agir pour le bien de la République menacée par les ambitions dictatoriales de Jules César, qui assassinent collectivement César au Sénat malgré les avertissements prémonitoires qu'il avait reçus, notamment celui de se méfier des ides de mars, complot que Brutus rejoint à contrecœur par pur patriotisme républicain plutôt que par ambition personnelle ou haine véritable envers César qu'il estime pourtant sincèrement par ailleurs. Shakespeare y développe, à travers le discours funèbre resté universellement célèbre que prononce Marc Antoine devant le corps de César, habile plaidoyer rhétorique qui retourne méthodiquement l'opinion publique romaine contre les conjurés en feignant initialement de ne vouloir que rendre hommage à Brutus tout en distillant progressivement des accusations dévastatrices contre les meurtriers, l'une des démonstrations les plus magistrales de manipulation rhétorique et de retournement de l'opinion publique de toute la littérature dramatique mondiale. La tragédie se conclut par la guerre civile qui s'ensuit inévitablement entre les partisans de César emmenés par Marc Antoine et Octave, et les conjurés républicains menés par Brutus et Cassius, dont la défaite finale et le suicide consacrent l'échec de leur tentative de préserver la République romaine face à l'inexorable avènement de l'Empire. Par sa réflexion politique sur l'ambition, le patriotisme et la manipulation de l'opinion publique, cette tragédie historique reste l'une des œuvres politiques les plus étudiées de tout le répertoire shakespearien. Shakespeare puise l'essentiel de sa matière historique dans les Vies parallèles de Plutarque, traduites en anglais par Thomas North, source qu'il suivra également pour Antoine et Cléopâtre et Coriolan, ses deux autres grandes tragédies romaines. La formule prêtée à César au moment de reconnaître Brutus parmi ses assassins, « Toi aussi, Brutus ? », reste l'une des répliques les plus universellement citées de toute la littérature occidentale, bien au-delà des seuls lecteurs de Shakespeare.